Markperlemorsommerfugl er en god flyver, med kraftfulde vingeslag, og en udpræget svævende flugt. Den kan ofte ses langt uden for sine lokaliteter. Markperlemorsommerfugl er en ivrig blomsterbesøger, der ikke er kræsen i sit fødevalg.
Larven overvintrer blandt vissen vegetation. Den lever af diverse violer og stedmoderblomster.
Levested: Markperlemorsommerfugl findes typisk på ugødede overdrev, tørre skovenge og heder, helst med en rig blomsterflora.